分太尼（Fentanyl）是一种μ-啊片受体激动剂，是*常用的镇痛药之一，可诱发包括产前和产期躯体感觉、行为、认知和运动功能受损等神经毒性，而这些神经毒性造成的表型与ASD极其相似。然而，目前没有评估分太尼与ASD的关系的研究，也不确定分太尼对小鼠孤独症样行为的影响。

产前因食用鱼类而接触甲基汞与包括Grin2b在内的基因的DNA甲基化变化有关，导致儿童期认知障碍。然而，尚不清楚在早期（大脑快速发育的时期）服用分太尼是否可以调节NMDA受体亚单位（例如GluN2B）的甲基化和表达，从而导致患者出现自闭症谱系障碍或啮齿动物出现自闭症样行为。

前扣带回皮质（ACC）处理认知和情绪，其在ASD中受到影响。ACC高表达μ-啊片受体，因此其在疼痛感知和调节中发挥重要作用。研究表明，NMDA受体与μ-啊片受体之间存在功能联系，而拮抗NMDA受体可抑制吗F诱导的镇痛耐受性。然而，尚不清楚分太尼诱导的ACC中μ-啊片受体的激活是否会导致表观遗传学改变（例如Grin2b的甲基化），从而导致自闭症样行为。

在此背景下，2022年6月11日同济大学医学院申远课题组在British Journal of Anaesthesia发表了题为Fentanyl induces autism-like behaviors in mice by hypermethylation of the glutamate receptor gene Grin2b的研究论文，论述了分太尼如何影响谷氨酸受体而引起小鼠自闭症样行为。

首先，课题组以C57雄性小鼠进行了一系列行为学测试，结果显示分太尼组小鼠在旷场中央停留时间较短，而移动距离较远；抓挠时间较长；进入开放臂的停留时间降低；三项社交中没有显著的社交偏好，而μ-啊片受体拮抗剂——纳洛酮可以缓解这些行为缺陷。在雌性小鼠中也观察到同样的现象。这些数据表明：分太尼可以诱导小鼠产生自闭症样行为。

鉴于NMDAR和ACC在ASD中的重要作用，课题组为了探究上述现象的分子机制，对ACC中NMDAR相关亚基做了进一步的研究。首先，课题组发现分太尼降低了雄性小鼠ACC中Grin2b mRNA的表达，而对Grin 1或Grin2a的表达没有影响；FISH（荧光原位杂交）定性分析显示分太尼降低了ACC中Grin2b的表达；而定量WB分析表明，分太尼降低了雄性小鼠ACC中GluN2B蛋白的含量。此外，聚类分析显示分太尼诱导Grin2b启动子区多个位点的高甲基化，而纳洛酮可减轻分太尼引起的变化。这些数据表明，分太尼诱导幼鼠出现的自闭症样行为可能与ACC中Grin2b表达的下调有关。

由于NMDA受体与μ-啊片受体之间存在功能联系，那么ACC中μ-啊片受体与Grin2b表达的下调引发的小鼠自闭样行为是否也有功能关系呢？

课题组使用DAMGO（一种选择性μ-啊片受体激动剂）在出生后第6、8和10天选择性激活μ-啊片受体。结果显示，DAMGO给药后将产生与分太尼给药后类似的行为学和分子学表型。即Grin2b表达的下调引发的小鼠自闭样行为可能与μ-啊片受体的激活有关。

*后，课题组进而于分太尼处理后（P10）在ACC中注射慢病毒以过表达Grin2b，发现小鼠的自闭症样行为中的焦虑和社交障碍得到了显著缓解（刻板行为除外）。此外，ACC中Grin2b的过度表达抑制了分太尼诱导的mTOR激活。然而，与ACC相邻的次级运动皮质中Grin2b的过度表达并不能减轻分太尼诱导的雄性小鼠的孤独症样行为，这进一步证明了ACC在ASD中的特殊作用。

总的来说，本文揭示了分太尼通过激活ACC中μ-啊片受体，导致该区域NMDA受体Grin2b基因超甲基化及蛋白表达降低，造成幼年小鼠远期出现自闭症样行为。