动物行为实验方法硬核总结:悬尾实验(Tail suspension test, TST)

一、实验原理


悬尾实验(Tail suspension test, TST)是一种经典而又能快速评价抗抑郁药wu、兴奋药wu、镇jing药wu药效的方法。其原理是利用小鼠悬尾后企图逃脱但又无法逃脱,从而放弃挣扎,进入特有的抑郁不动状态,实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁状态,抗抑郁药wu、兴奋药wu能明显地缩短改变其状态。

将实验动物的尾部进行固定,使其头部向下悬挂,动物在该环境中挣扎,企图摆脱该困境,在经过努力仍无法摆脱后,出现间断性不动,显示“行为绝望”状态。动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱,从而提供了一个无可回避的压迫环境,一段时间的实验后,记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态过程中的一系列参数,动物的表现出的这种典型的“不动状态”,反映了一种被称之为“行为绝望状态”,这种行为绝望模型类似,而且对绝大多数抗抑郁药wu敏感,而且其药效与临床药效显著相关,所以被广泛用于抗抑郁药wu的初选。


二、实验方法及注意事项


正确的悬尾实验该怎么做?搜索一下网页,看到实验者更关注一些细节问题,如:怎么悬挂?用什么悬挂?空间多少合适?距离底面多少?小鼠攀爬尾巴怎么解决等问题!如何避免老鼠疼痛引起不适?我们今天在这里讨论一下!供大家参考:


  1. TST 悬尾实验不建议用较重的大鼠,因为大鼠只能通过它们的尾巴来支持它们的体重,这对大鼠来说是痛苦的。同样的道理,应该注意避免使用异常重的小鼠(例如用于模拟肥胖的小鼠),在这种情况下,实验者应该寻找替代性的测试,例如强迫游泳实验。

  2. 动物从居住环境带入实验环境应适应一段时间,通常至少一个小时。

  3. 实验环境应保持安静,突然大的噪音会使小鼠惊慌失措。

  4. 使用软件分析时,选择*佳对比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可选择使用由亚搏APP·官方网站(中国)v2.78IOS下载/Android通用版/手机APP生产的带背光板的专业悬尾实验设备;对老鼠的颜色没有要求,更可拍摄出高质量,高对比度的实验录像。

  5. 每只小鼠的实验空间多大?参考空间在 55 高*15 宽*11.5 cm 左右,多通量实验时,为防止动物彼此观察或互相影响,中间用隔板隔开;动物悬挂在隔间中间,宽度和深度足够大,不能与墙壁接触。

  6. 悬挂后动物鼻尖与设备地板之前的距离多少?参考距离在 20~25 cm 左右。

  7. 底部建议放置一个可拆卸的拖盘,收集粪便或尿液。

  8. 悬挂用的胶带应牢固地粘贴在小鼠尾部和悬挂杆上,并且足够坚固以承受正在测试的小鼠的重量。但是,胶带不应该过于粘滞,因为在实验结束会从尾部移除。胶带尺寸应统一,长度 17 厘米,从一端 2 厘米做标记。这个 2 厘米的部分用于将胶带连接到尾部,而剩余的 15 厘米用于悬挂小鼠;胶带应贴在尾部的尾端,尾部留 2-3 毫米的距离。

  9. 尾巴攀爬阻止器,小鼠在实验过程,会出现追求和攀爬它们自己的尾巴的现象,这是个普遍的问题。解决方法很简单,而且非常有效:将一段塑料管切成 4 cm 长中空圆柱体(内径 1.3 cm 左右,1.5 g)放置在小鼠尾巴周围就能防止这种尾巴爬行行为。注意的是,在没有使用阻止器之前,已经成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此应将这类小鼠排除。

  10. 分析时仅有前肢但没有后肢介入的小动作可判断为不动;因惯性产生的摆动可判断为不动;

  11. 亚搏APP·官方网站(中国)v2.78IOS下载/Android通用版/手机APP推出的Super系列行为学 Tail Suspension 分析软件(SuperTst悬尾软件)可识别动物的多体位轮廓特征,准确区分并识别出活动和不动行为。

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  12. 实验结束后(通常是 6 分钟),将动物放回鼠笼,应轻轻将胶带从尾巴上拉下来,不要从尾巴上撕扯胶带,避免给动物带来痛苦;

  13. 清洁用品,每次实验完成,收集粪便和尿液,彻底擦拭悬挂盒。

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