分为训练和测试两阶段
(一)训练阶段(**天)
1.调试仪器,以确保格栅地板有电流刺激,扩音器有声音刺激,并分别记录电流强度和声音强度(分贝)。
2.将大鼠放入条件恐惧箱2min(A相),记录这*初2min内动物的凝滞(freezing)时间作基线。
3.接着加入卡嗒声,80Db,30s(B相)。
4.紧接着再给予电击,0.35mA,2s(C相),完成一轮训练。如需要多轮训练,则重复A、B、C三相训练即可。
5.记录整个训练阶段动物凝滞时间(s),用以测量动物的非条件恐惧(unconditioned fear)。
6.将大鼠移开操作箱。用70%的酒精或4%醋酸溶液彻底清洁操作箱,以备进行下一批动物的训练。
(二)测试阶段 在训练后的**天进行,包括关联(context)测试、变更关联(altered context)或条件刺激前(pre-conditioning-stimulus,pre-CS)测试以及条件刺激(conditioning stimulus,CS)测试。测试阶段没有电击刺激。关联测试和变更关联测试中也没有听觉条件刺激,但每只动物所用的操作箱应与训练阶段的相同。
1.关联测试 将动物放入箱内,计算机自动记录动物的凝滞行为。若用人工观察,则观察者(应不知道动物的处理或基因型)用静声秒表通过箱门上的猫眼(小窗口)观察动物的行为并计分:凝滞为1分,活动(moving)为0分(也有只记录凝滞时间)。每10秒观察一次,共5min,这样可记录到30次(bout)可能的凝滞(即*大凝滞得分为30分)。用在这一阶段记录到的、动物在同一操作箱内的凝滞时间测量动物的关联条件恐惧(contextually conditioned fear)。此为关联测试。观察结束后将动物放回笼内,清洁操作箱,进行下一只动物的观察。
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