穿梭、避暗(明暗箱)实验方法回避实验是利用动物的好暗避光(明暗穿梭)、对厌恶刺激(如足电击)的恐惧和记忆而建立起来的。所以对实验者(而不是对动物)而言,回避实验在技术上与暗示关联条件恐惧相类似。所用的刺激为温和的足电击,发生的反应是动物逃避曾经受到电击刺激的地方。根据动物的逃避方式分为主动回避和被动回避(active and passive avoidance)。前者要求动物主动从有厌恶刺激的箱中逃离;后者则要求动物遏制自己而不进入有厌恶刺激的箱。根据所用仪器设备的不同又可分为穿梭回避、跳台回避、Y-形迷宫回避。这里主要介绍前两种回避。
一、 实验设备
(一)穿梭回避实验设备 包括穿梭箱、刺激控制器和计算机。这里介绍亚搏APP·官方网站(中国)v2.78IOS下载/Android通用版/手机APP提供的穿梭箱。它包括左右两个同等大小(20.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主动回避可不用暗箱)。两隔室之间由一个拱形门(8.9cm*11.4cm)相联,门可由实验者根据实验需要关上或打开。隔室地板为不锈钢栅栏(直径:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。暗箱一侧的栅栏地板与刺激器相联,并可给予电击;明箱一侧则不与刺激器相联,故没有电流通过。
(二) 跳台回避实验装置 将上述穿梭箱的中门移去,代之以一个平台(可随Med Associates穿梭箱配套),即可改装成跳台回避实验装置。这里介绍美国另外一个仪器公司Coulboum仪器公司的跳台回避装置。它包括一个15cm*25cm*10cm的透明有机玻璃跳台箱、一个隔音外箱(48cm*62cm*24cm)和一台脉冲电刺激器组成。跳台箱底部的栅栏与刺激器相联,中央固定一个3.5cm*3.5cm*2.5cm的木制平台。实验时,将跳台箱放入隔音箱内,以防外界干扰。
二、实验方法
(一)小鼠穿梭被动回避实验(mouse step-through passive avoidance)
1.单次电击刺激训练
(1)将小鼠放入明箱,10s后,将明暗箱之间的门打开。多数品系的小鼠有很强的探究行为,喜暗恶光。因此,小鼠会很快进入暗箱。
(2)小鼠(四肢)完全进入暗箱后,立即将中门关上,并给予一次电击。电击强度为能引起小鼠退缩和发声的*小电流。根据小鼠品系不同,电流范围为0.2~0.8mA(100V,50~60Hz AC),持续1~2s。
(3)让小鼠在暗箱内停留10s(以使让动物形成箱与电击之间的关联),将小鼠放回笼内。清洁操作箱。进行下一只动物的训练。
2.记忆保持测试(retention test) 电刺激训练24h后,将小鼠放回明箱,中门打开,但不给电击。